Avaliação da segurança e imunogenicidade da vacina candidata ao controle da tuberculose pVAXhsp65 administrada por eletroporação em macacos cynomolgus (Macaca fascicularis) / Evaluation of safety and immunogenicity of the vaccine candidate for tuberculosis control pVAX-hsp65 administered by electroporation in cynomolgus monkeys (macaca fascicularis)

A tuberculose é uma doença infecciosa crônica causada pelo Mycobacterium tuberculosis e foi declarada emergência em saúde pública mundial pela Organização Mundial de Saúde. A tuberculose persiste como um problema de saúde mundial, em parte, porque os indivíduos infectados, muitas vezes, não aderem ao longo tratamento de forma devida. A ampla vacinação com a BCG reduziu a ocorrência das formas mais graves de tuberculose em crianças, porém, a forma adulta pulmonar é responsável pela principal causa de morte no mundo. A validação de novas vacinas para utilização na clínica humana, passa pela necessidade de se testá-las, ainda em fase pré-clínica, em modelo animal que desenvolva e reproduza de forma semelhante a doença humana. Avaliamos, neste estudo, os aspectos referentes à segurança do método de eletroporação e a imunogenicidade da vacina pVAX-hsp65, administrada em 3 doses com intervalo de 1 mês cada, em macacos cynomolgusForam realizadas análises clínicas, hemograma, teste de função renal, hepática, além da avaliação das subpopulações celulares (TCD4, TCD8, NK, linfócitos B, células dendríticas mielóide e plasmacitóide), marcador de ativação celular (HLA-DR e CD69), grânulos citotóxicos (granzima B/perforina), citocinas (IFN-gama, TNF-alpha, IL-12, IL-10, IL-2, IL-4, IL-5 e IL-6), marcadores de proliferação (Ki-67) e ligados a apoptose (BcL-2). A vacina se mostrou segura, sem causar efeitos adversos relacionados ao local da inoculação, não induziu disfunção hepática ou renal nem alterações hematológicas. A vacinação não induziu conversão ao teste tuberculínico. Observamos um aumento de células T CD4+ de memória central, o que caracteriza ativação celular...

Tuberculosis is a chronic infectious disease caused by Mycobacteriumtuberculosis and was declared a public health emergency by World HealthOrganization. Tuberculosis remains a worldwide health problem, partly becauseinfected individuals often refuse the long- treatment. Widespread vaccinationwith BCG reduced the occurrence of severe forms of tuberculosis in children;however, pulmonary tuberculosis in adult is the main cause of deathworldwide. To validate new vaccines for clinical use in human, preclinical testsin animal model to reproduce human disease is necessary. Our mean goal wasto evaluated, the safety and immunogenicity of a new vaccine pVAX-hsp65,administrated by electroporation in cynomolgus monkeys in three doses withone month apart. Clinical analyzes were performed: Red and white blood cellscount, renal and liver functional test, evaluation of lymphocyte subsets (CD4,CD8, NK, B lymphocytes, and myeloid and plasmacytoide dendritic cells),markers for cell activation (HLA-DR and CD69), activation of cytotoxic granules(granzyme B / perforin), cytokines (IFN-gamma, TNF-alpha, IL-12, IL-10, IL-2, Il-4, IL-5and IL-6), proliferation (Ki-67) and anti-apoptosis (BCL-2) markers. The vaccineproved to be safe, with no adverse effects related to the inoculation site and didnot induce liver or kidney dysfunction or hematological changes. Thevaccination did not convert the tuberculin skin test. We observed anenhancement of central memory TCD4 lymphocytes which indicates cellactivation...

Avaliação do fenótipo e estágio de ativação celularem primatas não-humanos (Macaca fascicularise Macaca mulatta) mantidos em cativeiro como base para estudo pré-clínico de vacinas / Evaluation of phenotype and activation stage celularem nonhuman primates (Macaca fascicularise Macaca mulatta) maintained in captivity as a basis for preclinical study of vaccines

Os primatas não-humanos vêm sendo utilizados na pesquisa biomédica há muitos anos, e tem provado ser um modelo relevante, devidoao alto nível de homologia com os humanos, principalmente em mecanismos fisiológicos, hematológicos e imunológicos. Nas últimas décadas, os macacos cynomolgus (Macaca fascicularis) e macacos rhesus (Macaca mulatta), estão entre os primatas não-humanos mais utilizados como modelo experimental, para o desenvolvimento de diversas doenças, incluindo o estudo da patogênese na tuberculose, contribuindo para numerosos avanços terapêuticos e testes vacinais. Apesar da existência de fármacos eficazes para o combate à maioria dos casos de TB, a vacinação representa uma alternativa importante para o seu controle. A avaliação da imunogenicidade de uma nova vacina para a TB, em estudo pré-clínico com primatas não-humanos, será o primeiro passo para se averiguar o posterior uso em humanosPara esta finalidade, é essencial, uma seleção apurada dos animais empregados, levandoem consideração o status clínico e imunológico...